正反相分析样品基本制备方法

正相、反相分析用的样品基本都可按照以下方法配制：

 

基本原则：

 

1、样品先在流动相中溶解，经过0.4~0.5μ的过滤器过滤后，注入10~50μL。样品在流动相中溶解后，Vo附近受到溶剂峰影响非常小，所以对分析在Vo附近洗脱的样品非常有利。(当色谱柱的尺寸是4.6mmI.D. x 150 ~250 mm L)

2、请避免过载

过载的判断方法 注入容量一定，把样品浓度稀释10~100倍来分析，或者样品浓度一定，把注入量减少到5分之一来分析的时候，如果峰型比以前的实验有所改善，有可能就是样品浓度或者注入容量的过载。

3、标准样品的注入量应该和实际样品的注入量相等。如果不相等的话可能会造成洗脱时间的差异。但是，标准样品的检定图谱没有问题也不能保证实际样品分析过程中不产生问题。虽然过载可能是产生问题的原因，但是主要还是因为把样品溶解在不正确的流动相中。 

 

故障：

 

(a) 形成前延峰或拖尾峰

(b) 洗脱时间改变

(c) 形成裂峰

(d) 形成宽峰

(如果宽峰太宽以致无法识别，可能会被误认为是基线混乱)

(e) 色谱柱压力上升

(f) 上述的故障只有特定的样品会产生