通常刚买回的
UPLC色谱柱都要进行老化处理,才能进行分析实验,目的就是为了除往管柱内剩余的溶剂、固定液的低沸程馏分及易挥发的杂质,同时使固定液更均匀牢固地分布于载体或管壁上。
经过老化后的UPLC色谱柱不但进步定量的正确度,还能延长UPLC色谱柱的寿命等作用。老化应遵循下面五大原则:
1.设置老化温度时,决不答应超过固定液的zui高使用温度。
2.根据涂渍固定液的百分数公道设置老化温度,低含量固定液的柱子,老化温度相对要低些。
3.老化时间与所用检测器的灵敏度和类型有关,灵敏度越高,要求老化的时间相对越长。
4.老化时间的是非也取决于固定液的特性,“气相色谱纯的”要少于“产业纯的”。例如,OV固定液老化时间要少于SE-60,QF-1(产业纯)。
5.样品的极性越强,要求填充柱老化的时间相对越长。
常用的UPLC色谱柱老化方法主要是气体活动法,即将柱的进口与进样室相连,不接检测器的情况下通进5——10ml/min的载气,以2——4°C/min程序升温至一定温度,该终点温度主要指低于固定液zui高使用温度的20——30°C,保持温度老化12——24个小时,直至获得平稳基线。根据不同的固定液,老化方式有所不同。
UPLC色谱柱的老化不仅对于新买的柱子而言,对于使用之后放置较长时间未使用的UPLC色谱柱同样也是需要再次老化,否则会影响分析结果的正确度。